產(chǎn)品簡介：本制品是94KD的耐熱的DNA聚合酶。是把Thermusaquaticus
DNA Polymerase的基因經(jīng)過克隆轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)后，
分離提取而得到的。它與天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。
該酶反應(yīng)需Mg2+參與，它以雙鏈DNA為模板催化核苷酸從5’向
3’末端形成雙鏈DNA。該酶同時具有5’→3’核酸外切酶活
性。該產(chǎn)品主要用于DNA的PCR擴(kuò)增，DNA測序，可以很好地?cái)U(kuò)
增1kb地DNA片段。該產(chǎn)品主要包括酶、10×反應(yīng)緩沖液與氯化
鎂溶液。
單位定義：在74℃，30分鐘內(nèi)，能夠吸收10mmol dNTP，形
成酸性不溶性物質(zhì)所需的酶量為一個活性單位。
酶儲存緩沖液B:
50％甘油，20mM Tris-HCl(pH8.0),100mM KCl，1mM
DTT，0.1mM EDTA，0.5％Tween20和0.5％Nonidet P40。
配套試劑：
1．10×反應(yīng)緩沖液(不含MgCl2): Taq DNA Polymerase
10 X Reaction buffer (without Mg2+)包含 500mM KCl,
100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton X-100.
建議該緩沖液加入每種dNTP的最適濃度為0.2毫摩爾。
2．25mM MgCl2：反應(yīng)中鎂離子在混合物中的最終濃度由
使用者根據(jù)自己需要決定。建議使用濃度在1－4毫摩爾。
注：使用前完全溶解氯化鎂溶液并充分振蕩幾秒鐘。
3．10X反應(yīng)緩沖液(含MgCl2)：包含 15mM MgCl2，
500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton
X-100. 建議該緩沖液加入每種dNTP的最適濃度為0.2毫
摩爾。
注意：反復(fù)凍融可能會引起氯化鎂沉淀，將緩沖液在90℃加熱
10分鐘能恢復(fù)溶液的均一性。
質(zhì)量控制：
1. 活性:大于5單位/微升。
2. Overdigest (OD) 檢測: 30單位Taq DNA 聚合酶與1微克
λDNA在74℃下反應(yīng)16小時后，用瓊脂糖凝膠電泳未檢
出降解的λDNA。
3. 切口酶檢測: 30單位Taq DNA 聚合酶與1微克超螺旋質(zhì)
粒DNA在74℃下反應(yīng)4小時后，用瓊脂糖凝膠電泳未檢
出切口酶或線性DNA帶。
4. 熱穩(wěn)定性檢測: 94℃時，每微升5單位Taq DNA 聚合酶在
緩沖液中的半衰期長于1小時。
儲存條件：?20℃
From Promega M1665S

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