Bio-Rad推出經(jīng)過驗證的數(shù)字PCR分析
隨著數(shù)字PCR的概念逐漸為大家所知,Bio-Rad公司也陸續(xù)推出了更多產(chǎn)品。近日,它推出了適用于微滴式數(shù)字PCR(ddPCR™)的PrimePCR™分析。這些預(yù)設(shè)計的分析可檢測稀有突變和拷貝數(shù)變異,在無需標準曲線的情況下提供單拷貝的PCR分辨率。
微滴式數(shù)字PCR技術(shù)帶來了目標DNA分子的絕對定量。研究人員可利用ddPCR分析來加速探索,開發(fā)遺傳病、癌癥和傳染病的新研究策略。ddPCR的高靈敏度讓它成為多個應(yīng)用的理想選擇,包括拷貝數(shù)變異、稀有突變檢測以及核酸序列的絕對定量。
Bio-Rad此次發(fā)布了14個突變檢測分析以及配對的野生型分析,適用于生物學相關(guān)和高度流行的癌癥突變目標的檢測。很多人感興趣的癌癥基因突變(如BRAF V600E和EGFR T790M)都在這一批分析中。
這些分析,再加上Bio-Rad ddPCR系統(tǒng)的靈敏度,能夠在2,000或更高野生型分子的背景下檢測單拷貝的突變(0.05%突變頻率)。ddPCR的精確度也讓癌癥研究人員能夠區(qū)分微小的拷貝數(shù)變化。
Bio-Rad基因表達部門的市場部經(jīng)理Richard Kurtz表示:“我們很高興,因為這些是第一批經(jīng)過充分驗證的數(shù)字PCR分析。這些預(yù)設(shè)計的分析卸下了分析設(shè)計的包袱,讓數(shù)字PCR對客戶而言更加輕松。”
此外,Bio-Rad還與Biogazelle(qPCR數(shù)據(jù)分析和服務(wù)公司)以及Integrated DNA Technologies(一流的寡核苷酸制造商)合作,設(shè)計、優(yōu)化并在實驗室驗證了這些分析。PrimePCR ddPCR分析采用均一的循環(huán)條件,不需要優(yōu)化。引物特異性已經(jīng)過新一代測序的驗證,且所有分析都在Bio-Rad的QX100™ 微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)上驗證過。
之前,Bio-Rad曾推出了經(jīng)過實驗室驗證的實時定量PCR分析,可滿足MIQE指南。那些PrimePCR產(chǎn)品滿足以下標準:可準確檢測20個拷貝;引物二聚體形成和基因組DNA交叉反應(yīng)性極少;擴增效率在90%-110%;動態(tài)范圍至少在6個數(shù)量級;R2>0.98。
如今,PrimePCR產(chǎn)品包括:覆蓋人類和小鼠基因組的SYBR Green分析,適合人類和小鼠目標的qPCR探針分析,ddPCR™探針分析,以及預(yù)設(shè)計的通路和疾病panel。此外,還有各種定制分析。
Bio-Rad還專門設(shè)計了一個在線訂購網(wǎng)站,讓研究人員能夠快速選擇技術(shù)(qPCR或ddPCR)、試劑(SYBR Green或探針)、應(yīng)用(基因表達、拷貝數(shù)或突變檢測)和物種(人或小鼠)。
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